DNA范文10篇
時間:2024-01-21 02:20:18
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DNA鑒定技術在法醫(yī)物證檢驗的應用
摘要:為了進一步優(yōu)化法醫(yī)物證檢驗工作質量與效率,提出合理應用DNA鑒定技術的建議。文章在闡述DNA鑒定技術概念、法醫(yī)DNA檢驗原理的基礎上,較為詳細的探究DNA技術在法醫(yī)物證檢驗實踐中的應用情況,包括多點位DNA指紋技術、VNTR-PCR技術、線粒體DNA分析技術等,以供同行參考借鑒。
關鍵詞:法醫(yī)物證檢驗;多點位DNA指紋、VNTR-PCR、線粒體;DNA分析
1865年,孟德爾遺傳規(guī)律的發(fā)現(xiàn)奠定了DNA鑒定工作的理論基礎,而且隨著近代人類遺傳學不斷取得發(fā)展進步,陸續(xù)為法醫(yī)物證檢驗實踐活動提供了各種技術方法[1]。DNA鑒定技術將遺傳學作為理論基礎,將生物檢材內的DNA作為目標研究對象,主要協(xié)助法醫(yī)物證檢驗人員解決個體辨識與親子鑒定等問題,DNA技術在提升法醫(yī)物證檢驗工作效率、結果精確性方面做出很大貢獻,表現(xiàn)出較高的應用價值。
一、簡述
DNA技術DNA是一種經(jīng)典的DNA分析雙螺旋結構,是現(xiàn)代生命科學中的重要發(fā)現(xiàn)之一,對分子生物學的發(fā)展起到了正向促進作用,也是當下生物學、現(xiàn)代醫(yī)學領域中研究的重點課題之一。既往已經(jīng)有很多實驗證實,DNA雙螺旋結構有復制、傳遞遺傳信息的作用,而后有科學家探明了其內包含的信息,可以用其解釋人類遺傳物質的傳遞方式。在遺傳學內,DNA基因發(fā)生重新排列、突變會使不同個體的基因存在一定差異。通常而言,案件在發(fā)生過程會出現(xiàn)某些生物檢材,利用DNA技術檢測鑒定這些檢材,能夠協(xié)助工作人員盡早確定案發(fā)現(xiàn)場的可疑人員,這表明了DNA鑒定技術用于案件中能發(fā)揮較大作用,能為案件偵破提供直接證據(jù)[2]。當下,在分析DNA技術的基本概況時,能夠探明到System可被用于DNASTR基因座系統(tǒng)內這一事實,PentaE、D18SS1、THOI等均是較常用的基因座。以上這些基因座在同個管子內擴增,各自不僅具備獨特的作用,在現(xiàn)實的DNA鑒定中還能將自身的優(yōu)越性充分發(fā)揮出來,協(xié)助警方高效率的處理案件。并且近些年社會中很多普通民事糾紛事件中應用DNA進行鑒定的情況較多,且這一需求有不斷增長的趨勢,故而提升DNA鑒定技術的精確度與時效性有很大現(xiàn)實意義,研發(fā)出很多多基因座的試劑。
二、法醫(yī)DNA檢驗的應用原理
小議DNA證據(jù)在刑事訴訟程序中的應用
摘要:隨著現(xiàn)代科學技術的飛速發(fā)展,專家證據(jù)中的DNA證據(jù),由于其獨特的優(yōu)勢,在刑事訴訟過程中發(fā)揮著越來越重要的作用,尤其是在糾正刑事錯案中的功能更是獨一無二。但DNA證據(jù)并非永遠正確,它也會受到人為因素的影響而出現(xiàn)差錯。為了盡可能避免刑事錯案的發(fā)生,我國應建立DNA數(shù)據(jù)庫并制定規(guī)范的DNA檢測程序,同時重視證據(jù)鏈問題,加速科學證據(jù)立法的步伐。
關鍵詞:DNA證據(jù)刑事訴訟程序刑事錯案
刑事錯案是一個沉重的歷史話題,由于人們認識能力的局限及各種因素的影響,錯案在任何一個時代、任何一個社會都難以避免。隨著科學技術的飛速發(fā)展,物證在刑事訴訟過程中越來越占據(jù)重要的地位,DNA證據(jù)則以其獨特的魅力為控辯雙方所青睞,有關DNA專家證據(jù)的采納標準問題經(jīng)常成為法庭上爭論的焦點,而DNA證據(jù)在糾正刑事錯案中的作用也是其他證據(jù)所無可比擬的。
一、DNA證據(jù)的特點及優(yōu)勢
DNA檢測作為一種特殊的證據(jù),與其他證據(jù)相比,具有獨特的證據(jù)價值。該證據(jù)的特點主要表現(xiàn)在:一是DNA證據(jù)的準確率高。根據(jù)科學家們的研究結果,如果用33.15DNA探針,兩個無關個體之間相同的機會小于3000億分之一,即便是同胞兄弟姐妹之間,完全相同的概率也只有200萬分之一;如果用33.15和33.6兩個探針,無關個體之間的相同機會就更小;二是DNA證據(jù)的穩(wěn)定性強。刑事案件的絕大多數(shù)證據(jù)都會隨著時間的推移而消失,或者受天氣、溫度等環(huán)境條件的變化而失去原有的價值。與之相比,DNA證據(jù)則不會受上述條件的影響,即便是埋葬在地下多年的白骨,也能通過DNA檢測確定死者的身份;三是DNA證據(jù)具有客觀性,不受作證者主觀意念的影響。DNA檢測結果是否與案件事實有關,是以科學的結論為依據(jù)的,無論操作者是誰,只要遵循科學的檢測程序,其結果都是一樣的;四是DNA檢測時間短、識別率高,且所需檢材少,特別適合刑事案件的偵查工作。
DNA證據(jù)的特點也就是其優(yōu)勢所在。除了上述幾個方面的優(yōu)勢外,DNA證據(jù)還有一大優(yōu)勢,就是其保存時間長,可達數(shù)年之久,并能經(jīng)受一定程度的污染。而傳統(tǒng)的血液檢測結果保存時間最長不超過一個月,經(jīng)典的遺傳標記系統(tǒng)也容易被化學物品、微生物等污染而迅速變質。
剖析乙肝兩對半檢查病毒DNA論文
【摘要】目的研究HBV血清學標志物(兩對半)和HBVDNA兩者之間的相關性,為確定乙肝檢測項目提供科學依據(jù)。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測健康體檢者HBV血清學標志物,核酸擴增熒光定量檢測法檢測HBVDNA,并采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。結果476例HBsAg陽性血清中,HBVDNA陽性321例,陽性率67.44%;乙肝大三陽HBVDNA陽性率92.17%,小三陽HBVDNA陽性率為61.00%,兩者差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);HBeAg陽性標本中HBVDNA陽性率為92.17%,HbeAg陽性標本中HBVDNA陽性率為67.44%,兩者差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。結論HBV血清學標志物和HBVDNA二者之間互有聯(lián)系但又有所不同,不能只以HbeAg的檢測結果作為判斷HBV傳染性和復制的指標,而應選擇檢測HBVDNA作為補充。
【關鍵詞】乙肝兩對半;乙肝病毒DNA;陽性率
據(jù)估計,全世界現(xiàn)有乙肝病毒攜帶者3.6億,其中我國約有1.3億。乙型肝炎的流行不僅影響整個民族的健康素質,也給社會帶來沉重的經(jīng)濟負擔,已成為我國目前最為突出的公共衛(wèi)生問題之一。目前診斷乙型肝炎最常用的指標是檢測乙肝病毒(HBV)血清學標志物(即兩對半)。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測HBV血清學標志物只能反映人體對HBV的免疫反應狀態(tài),不能直接反映HBV在患者體內的復制情況,也不能作為判斷患者是否具有傳染性的直接證據(jù)[1]。而HBVDNA含量是判斷病毒復制活躍和具有傳染性的直接和可靠的依據(jù),定量檢測HBVDNA是衡量乙肝傳染性的最精確的指標,是確定HBV感染不同復制狀態(tài)的有效檢測手段[2]。為了進一步研究HBV血清學標志物和HBVDNA兩者之間的相關性,我們對2005至2008年來吉林省吉林中西醫(yī)結合醫(yī)院做健康檢查的3415名正常健康者進行HBV血清學標志物和HBVDNA檢測,現(xiàn)將檢測結果分析如下下載論文。
1基本情況
1.1標本來源
2005至2008年吉林省吉林中西醫(yī)結合醫(yī)院3415名健康體檢者血清中HBV血清學標志物陽性512份。
DNA證據(jù)在刑事訴訟程序的應用探索
摘要:隨著現(xiàn)代科學技術的飛速發(fā)展,專家證據(jù)中的DNA證據(jù),由于其獨特的優(yōu)勢,在刑事訴訟過程中發(fā)揮著越來越重要的作用,尤其是在糾正刑事錯案中的功能更是獨一無二。但DNA證據(jù)并非永遠正確,它也會受到人為因素的影響而出現(xiàn)差錯。為了盡可能避免刑事錯案的發(fā)生,我國應建立DNA數(shù)據(jù)庫并制定規(guī)范的DNA檢測程序,同時重視證據(jù)鏈問題,加速科學證據(jù)立法的步伐。
關鍵詞:DNA證據(jù)刑事訴訟程序刑事錯案
刑事錯案是一個沉重的歷史話題,由于人們認識能力的局限及各種因素的影響,錯案在任何一個時代、任何一個社會都難以避免。隨著科學技術的飛速發(fā)展,物證在刑事訴訟過程中越來越占據(jù)重要的地位,DNA證據(jù)則以其獨特的魅力為控辯雙方所青睞,有關DNA專家證據(jù)的采納標準問題經(jīng)常成為法庭上爭論的焦點,而DNA證據(jù)在糾正刑事錯案中的作用也是其他證據(jù)所無可比擬的。
一、DNA證據(jù)的特點及優(yōu)勢
DNA檢測作為一種特殊的證據(jù),與其他證據(jù)相比,具有獨特的證據(jù)價值。該證據(jù)的特點主要表現(xiàn)在:一是DNA證據(jù)的準確率高。根據(jù)科學家們的研究結果,如果用33.15DNA探針,兩個無關個體之間相同的機會小于3000億分之一,即便是同胞兄弟姐妹之間,完全相同的概率也只有200萬分之一;如果用33.15和33.6兩個探針,無關個體之間的相同機會就更??;二是DNA證據(jù)的穩(wěn)定性強。刑事案件的絕大多數(shù)證據(jù)都會隨著時間的推移而消失,或者受天氣、溫度等環(huán)境條件的變化而失去原有的價值。與之相比,DNA證據(jù)則不會受上述條件的影響,即便是埋葬在地下多年的白骨,也能通過DNA檢測確定死者的身份;三是DNA證據(jù)具有客觀性,不受作證者主觀意念的影響。DNA檢測結果是否與案件事實有關,是以科學的結論為依據(jù)的,無論操作者是誰,只要遵循科學的檢測程序,其結果都是一樣的;四是DNA檢測時間短、識別率高,且所需檢材少,特別適合刑事案件的偵查工作。
DNA證據(jù)的特點也就是其優(yōu)勢所在。除了上述幾個方面的優(yōu)勢外,DNA證據(jù)還有一大優(yōu)勢,就是其保存時間長,可達數(shù)年之久,并能經(jīng)受一定程度的污染。而傳統(tǒng)的血液檢測結果保存時間最長不超過一個月,經(jīng)典的遺傳標記系統(tǒng)也容易被化學物品、微生物等污染而迅速變質。
DNA工業(yè)設計管理論文
內容摘要:將生物學領域的遺傳基因DNA與工業(yè)設計理論相結合,借鑒生物基因工程原理,探索工業(yè)設計中產(chǎn)品族設計DNA的基本理論。討論了產(chǎn)品族以及產(chǎn)品族設計DNA的概念,分析了產(chǎn)品族設計DNA在產(chǎn)業(yè)界和學術界的應用研究,探討了產(chǎn)品族設計DNA的內涵以及研究內容,指出了產(chǎn)品族設計DNA的發(fā)展趨勢。
隨著技術的同質化,產(chǎn)品不再只滿足于功能性的要求,如何賦予產(chǎn)品特殊的形態(tài)與風格意象以塑造獨特的品牌,已經(jīng)成為產(chǎn)品開發(fā)的重要工作之
一。在那些著名企業(yè),產(chǎn)品的風格總是在不斷創(chuàng)新中保持一定的繼承性,如奔馳、寶馬、諾基亞,無論旗下的產(chǎn)品經(jīng)過多少更新?lián)Q代,人們總能將它們從眾多品牌的產(chǎn)品中識別出來。然而,產(chǎn)品設計充滿了模糊性與不確定性,很難以傳統(tǒng)的手段解構其造型法則,一般都是設計師憑借自身的經(jīng)驗與靈感,將設計意圖映射到新設計當中。由于缺乏理性的支持,難以形成一套切實可行的風格導向的產(chǎn)品設計方法。
一、產(chǎn)品族以及產(chǎn)品族設計DNA的概念
1.產(chǎn)品族的概念
產(chǎn)品族(ProductFamily)是指以產(chǎn)品平臺為基礎,通過共享通用技術并定位于一系列相關聯(lián)的市場應用的一組產(chǎn)品,它是一種利用有限的開發(fā)、制造和服務來經(jīng)濟地發(fā)展產(chǎn)品多樣性的方法。
偵察破案中指紋技術的應用論文
DNA指紋技術,是英國萊斯特大學教授杰弗里斯于1985年發(fā)明的.由于它可以解決法醫(yī)技術領域同一認定的問題,因此引起了世界各國警察、司法部門的極大重視。目前,英、美、西德、日、意等比較先進的國家對DNA的研究己達到了相當?shù)乃?,“并已將其應用到許多實際案例中,其準確無誤的鑒定結果證明,它大大地提高了生物物證應有的價值。”因此,它被稱為“90年代打擊犯罪的利器?!?/p>
1、DNA指紋技術
每個人身上(包括動植物個體)都擁有一套獨一無二的遺傳密碼,這些密碼記錄著人體成長的所有訊息,除了極少數(shù)(如紅血球)外,幾乎人身上的每一個細胞都含有這套完整的遺傳密碼。這些密碼存在于細胞里的細胞核內,其中23對染色體就是用來儲存這些密碼的,而這些密碼就是由DNA分子所組成。DNA本身則是由四個氮堿基質(代碼為A、G、T和C)以磷酸雙醋鍵結合而成,這個氮堿以長鏈狀結構排列形成染色體,其基本結構形如(圖l)
雙股螺旋形的DNA,其氮基質AT、GC相互成對,且兩股間的A與T、G與C相互對應互補產(chǎn)生了DNA的重要特性。同時AGTC四個氮堿在整條DNA(的)鏈中的重復排列形成了DNA序列。就人類而言,每一個細胞里大約有30億個A一T或G一C相互排列的氮堿對,組成人類的基因組,這些組合在人體形成到生長過中永遠存在。并且在龐大的DNA序列,它的排列也是有規(guī)律的。依目前的技手段來說,使用多基因位探子鑒定,可到一百萬億分之一的準確率,也就說在過一百萬億的人口中才有可能遇到兩個NA指紋相同的人。但這個數(shù)字己遠遠過了整個世界人口。其特定性非??桑挥脩岩?。正因為科學家們從人體身攜帶的遺傳密碼DNA(去氧核糖核)中成功地證明了其與手紋同樣具有“人各不同”的特定性,才共同將DNA之為“DNA指紋?!?/p>
2、DNA指紋的利用
DNA指紋不僅具有取代手指指紋作人別鑒定依據(jù)的潛力,而且在打擊犯罪面,也具有更大的優(yōu)越性。由于DNA指紋轉換成數(shù)字儲存在電腦中比指紋的儲存更為方便,可大量地節(jié)省記憶的空間,增加儲存量,縮短查尋比對時間。因此,如果能用電腦來處理DNA指紋檔案,即使是對毫無線索的刑事案件,只要在犯罪現(xiàn)場找到兇手所遺留的任何生物物證,而鑒定其DNA指紋,即可迅速地在電腦檔案中找出罪犯,對目前警方制止和打擊犯罪的能力將大大地提高。況且,手指可能因受傷或被砍斷而失去指紋,但DNA指紋卻存在于身上每一個角落,就是飛機爆炸僅剩下人身上的一塊肉,或是殺人焚尸只剩下一塊白骨,DNA指紋仍然存在。
工業(yè)設計產(chǎn)品管理論文
內容摘要:將生物學領域的遺傳基因DNA與工業(yè)設計理論相結合,借鑒生物基因工程原理,探索工業(yè)設計中產(chǎn)品族設計DNA的基本理論。討論了產(chǎn)品族以及產(chǎn)品族設計DNA的概念,分析了產(chǎn)品族設計DNA在產(chǎn)業(yè)界和學術界的應用研究,探討了產(chǎn)品族設計DNA的內涵以及研究內容,指出了產(chǎn)品族設計DNA的發(fā)展趨勢。
關鍵詞:產(chǎn)品設計,產(chǎn)品族,DNA,知識
隨著技術的同質化,產(chǎn)品不再只滿足于功能性的要求,如何賦予產(chǎn)品特殊的形態(tài)與風格意象以塑造獨特的品牌,已經(jīng)成為產(chǎn)品開發(fā)的重要工作之一。在那些著名企業(yè),產(chǎn)品的風格總是在不斷創(chuàng)新中保持一定的繼承性,如奔馳、寶馬、諾基亞,無論旗下的產(chǎn)品經(jīng)過多少更新?lián)Q代,人們總能將它們從眾多品牌的產(chǎn)品中識別出來。然而,產(chǎn)品設計充滿了模糊性與不確定性,很難以傳統(tǒng)的手段解構其造型法則,一般都是設計師憑借自身的經(jīng)驗與靈感,將設計意圖映射到新設計當中。由于缺乏理性的支持,難以形成一套切實可行的風格導向的產(chǎn)品設計方法。
一、產(chǎn)品族以及產(chǎn)品族設計DNA的概念
1.產(chǎn)品族的概念
產(chǎn)品族(ProductFamily)是指以產(chǎn)品平臺為基礎,通過共享通用技術并定位于一系列相關聯(lián)的市場應用的一組產(chǎn)品,它是一種利用有限的開發(fā)、制造和服務來經(jīng)濟地發(fā)展產(chǎn)品多樣性的方法。
乙型肝炎病毒檢測分析論文
論文關鍵詞:前S2抗原;HBV-DNA;乙型肝炎病毒標志物
論文摘要:目的:探討乙肝病毒前S2抗原(pre-S2Ag)的檢測及其臨床意義。方法:對188例標本采用ELISA法進行乙型肝炎病毒標志物fHBVM1及pre-S2Ag檢測,并對其中162例標本應用熒光定量PCR法檢測HBV-DNA。結果:162例血清標本同時檢測HBV-DNA和pre-S2Ag,兩者檢出率差異無統(tǒng)計學意義(X2=2.78,P>0.05)。HBeAg(+)與HBeAb(+)組之間pre-S2Ag陽性率的差異有統(tǒng)計學意義(X2=28.03,P<0.005)。HBeAg(+)組、HBclgM(+)組pre-S2Ag陽性率為100%,HBSAg(+)的肝癌組pre-S2Ag陽性率達95.0%,結果明顯高于HBV-DNA(-)組18.4%,P值均<0.005。結論:pre-S2Ag是反映病毒感染與復制的指標,與臨床病情活動有關,可作為療效和預后的觀察指標,能完善和補充乙肝病毒血清標志物的檢測。
我國是乙型肝炎病毒(HepatitiSBViruS,HBV)感染的流行區(qū),乙型肝炎病毒是引起病毒性肝炎最常見的溶血性病毒,不僅人群感染率高。而且有些HBV感染可能由于外周耐受,T細胞反應低下、抗原呈遞抑制、選擇性免疫抑制、病毒基因表達下調或基因變異等導致T細胞識別障礙,容易轉為慢性感染。部分患者可演變?yōu)楦斡不踔猎l(fā)性肝癌。不同的HBV血清免疫標志物模式提示不同的臨床意義,HBV-DNA是判定HBV感染者病毒是否復制和當前有無傳染性的主要指標,了解免疫學和分子生物學標志物間的關系對臨床診斷和治療很有價值。據(jù)估計無癥狀的乙肝病毒攜帶者達1.2億,乙肝患者3000多萬,其中15%~25%的患者將死于慢性肝病(肝癌、肝硬化),給人類健康帶來極大危害。為了能及時、準確地診斷,以指導治療及判斷預后,乙肝病毒的檢測指標日益增多。文獻資料顯示,pre-S2Ag在乙肝HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)模式中陽性檢出率最高,抗HBSAg(+)、抗HBe(+)、抗HBe+模式中次之,其他模式較低。本文就pre-S2Ag陽性率與HBV-DNA、HBVM檢測結果進行比較分析,旨在探討pre-S2Ag檢測的臨床意義,現(xiàn)總結分析報道如下:
1.資料與方法
1.1標本來源
搜集本院2006年3~12月門診和入院患者188例,其中同時檢測HBVM及HBV-DNA共162例:另外急性乙肝患者6例,乙肝表面抗原陽性并臨床診斷為肝癌患者20例。
腫瘤疫苗的作用機制
1腫瘤特異性免疫機制及腫瘤的免疫逃逸機制腫瘤在機體內能引發(fā)體液免疫應答和細胞免疫應答,而以后者為主.腫瘤抗原在細胞內加工成肽段后與細胞表面的主要組織相容性復合體Ⅰ(majorhistocompatibilitycomplex,MHCⅠ)類分子結合并呈遞給CD8+細胞毒性T淋巴細胞,或先從腫瘤細胞上脫落,再由抗原提呈細胞攝取、加工成肽段后與表面MHCⅡ類分子結合并呈遞給CD4+輔助性T淋巴細胞,進而誘發(fā)機體的抗腫瘤細胞免疫應答.值得注意的是CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞的激活都需要MHC抗原肽復合物和免疫共刺激分子的協(xié)同刺激作用[1],而共刺激分子的缺失正是腫瘤引發(fā)的機體外周免疫耐受的可能機制之一.腫瘤由于其極大的異質性和遺傳不穩(wěn)定性,在機體環(huán)境長時間的免疫選擇壓力下,會啟動一系列的免疫逃避機制,對抗機體的抗腫瘤免疫反應.這些機制分別針對T細胞對腫瘤的識別階段和效應階段,包括腫瘤抗原的丟失、MHCⅠ類分子表達下調、抗原加工缺陷、表達干擾細胞毒作用的蛋白酶及表達FasL等[2].
2腫瘤疫苗的設計策略
2.1總體思路針對腫瘤抗原在機體內免疫原性下降,造成特異性細胞免疫激活不足,外周免疫耐受的狀況,腫瘤疫苗設計策略的總體思路是應用各種技術,增強免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的識別能力,改善免疫微環(huán)境,引發(fā)有力的特異性抗腫瘤細胞免疫,阻止腫瘤進展,最終消除腫瘤.
2.2腫瘤細胞疫苗腫瘤細胞疫苗是將整個腫瘤細胞作為抗原導入患者體內,誘導特異性的抗腫瘤免疫應答.由于腫瘤細胞帶有腫瘤的全部抗原,無需考慮分離腫瘤特異性抗原(tumorspecificantigen,TSA),而且由于自體腫瘤細胞具有和正常組織相同的人類白細胞抗原,不會引發(fā)機體的免疫排斥反應,因此被認為是理想的腫瘤疫苗方案.但是自體腫瘤組織來源十分有限,并且考慮到TSA的表達具有一定的組織特異性,因此這種方法的應用受到了限制[3].后來,人們開始使用人工培養(yǎng)的同種異體腫瘤細胞系進行腫瘤疫苗的研究.不同腫瘤細胞的混合能夠提供一系列的TSA,有利于增加腫瘤疫苗的免疫原性,減小其發(fā)生抗原丟失的幾率[2].但是,單獨使用自體或異體的腫瘤細胞難以產(chǎn)生足夠強度的免疫應答,免疫佐劑的使用極大地改善了這種情況.隨著基因工程的進展,人們開始對腫瘤細胞進行基因修飾,將編碼免疫共刺激分子如CD80,CD86的基因,導入腫瘤細胞中,為T細胞活化提供第二信號,有效地打破了腫瘤的外周免疫耐受.近年來,也有人將編碼一些細胞因子如IL2,IL12,粒巨噬細胞集落刺激因子(granulocytcmacrohagecolonystimulatihyfactor,GMCSF)等的基因導入腫瘤細胞,期望通過細胞因子蛋白的表達,改善腫瘤組織局部免疫微環(huán)境,增強T細胞的抗腫瘤免疫效應[4].然而,近些年來臨床實驗表明,即使在實驗中能夠誘發(fā)滿意免疫反應的腫瘤細胞疫苗,在轉化成臨床有效的治療性腫瘤疫苗時都遇到了困難.Fifis等[5]的研究發(fā)現(xiàn),大鼠結腸癌細胞系經(jīng)體外培養(yǎng)后免疫同源小鼠,引發(fā)了免疫反應和腫瘤保護效應.然而,當他們對荷瘤小鼠進行同樣處理時,卻大大促進了腫瘤的生長,提示腫瘤細胞能夠通過一系列機制抑制機體的抗腫瘤免疫反應,包括分泌免疫抑制因子IL10,腫瘤生長因子β阻止有效的免疫反應;分泌血管內皮細胞生長因子,GMCSF等因子活化具有免疫抑制作用的骨髓源性細胞;激活特異的調節(jié)性CD4+CD25+T細胞以下調細胞毒性T淋巴細胞的效應等.
2.3腫瘤抗原疫苗腫瘤能夠引起機體特異性免疫反應的現(xiàn)象引發(fā)了對腫瘤抗原的研究.腫瘤抗原包括多個層次:完整的蛋白質分子、抗原肽及純化的DNA.關于腫瘤DNA疫苗,下文將另行討論.目前將腫瘤抗原分為TSA和腫瘤相關抗原(tumorassociated,TAA).TSA是指只存在于腫瘤細胞,而TAA并非腫瘤細胞特有的抗原,只是在發(fā)生腫瘤時此類抗原的表達明顯上調.Tabi等[2]認為,腫瘤抗原必須在全部或大多數(shù)患有相同腫瘤患者的大部分腫瘤細胞中呈普遍的高表達狀態(tài).他將腫瘤抗原分為5類:①突變抗原;②腫瘤細胞過度表達抗原;③癌睪抗原;④組織特異性分化抗原;⑤病毒抗原.
單獨應用腫瘤抗原蛋白存在免疫原性差的問題,這是由于腫瘤細胞可通過抗原、HLA缺失等機制發(fā)生逃逸.劉宏利等[6]結合了肽疫苗和DNA疫苗各自的特點,以P815腫瘤細胞的CTL表位(P815A3543)為模型,合成該表位加多聚賴氨酸的顆粒性多肽,并制備含有編碼此表位和GMCSF基因的表達質粒,制成了新型的顆粒性肽DNA復合疫苗,這種疫苗利于APC的攝取加工,可誘導有效的CTL應答,從而預防小鼠致命性P815腫瘤細胞攻擊,并可部分根除腫瘤.
免疫佐劑研究進展論文
論文關鍵詞:殼聚糖;理化性;免疫佐劑;疫苗
論文摘要:免疫佐劑是一種免疫調節(jié)劑,可增強抗原的免疫原性、提高免疫效果。為增強疫苗的免疫原性在病毒性疫苗、DNA疫苗、多肽疫苗的研制中常加入免疫佐劑。目前批準可用于人體的免疫佐劑是鋁佐劑,因只能引起體液免疫,不能有效誘導細胞免疫,因此尋找新的免疫佐劑已成為疫苗研制迫切需要解決的問題。研究表明,殼聚糖具有免疫佐劑效應,具有良好的組織相容性,可生物降解,安全無毒,因此殼聚糖將成為一種很有應用價值的免疫佐劑。本文就殼聚糖的理化性及其免疫佐劑研究做一綜述。
殼聚糖(Chitosan),也稱幾丁聚糖、脫乙酰幾丁質、聚氨基葡萄糖、可溶性甲殼素,化學名為β(1,4)-2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖,由蝦、蟹等富含甲殼素的物質經(jīng)脫鈣、脫蛋白、脫色、脫乙酰等工藝加工而成,是甲殼質脫乙酰反應后的物質,為分子量90~120kDa的生物大分子。從Braconot于1811年描述甲殼素迄今,甲殼素和殼聚糖的發(fā)展歷史已有100多年。但由于殼聚糖具有提高免疫、活化細胞、預防癌癥、抗衰老,調節(jié)機體等作用,因此在醫(yī)藥、保健、食品等多領域具廣泛的用途。
1殼聚糖的理化性
甲殼素[1]廣泛存在于甲殼綱動物蝦和蟹的甲殼、昆蟲的甲殼、真菌(酵母、霉菌)的細胞壁和植物(如蘑菇)的細胞壁中。自然界每年生物合成的甲殼素將近100億噸,是自然界中儲量僅次于纖維素的第二大天然有機化合物。殼聚糖是甲殼素的N-脫乙?;漠a(chǎn)物,通常把脫去55%以上N-脫乙酸基,且能溶于1%乙酸或1%鹽酸的甲殼素稱之為殼聚糖。甲殼素與殼聚糖的差別,僅僅是N-脫乙酰度不同而已。殼聚糖是白色無定形、半透明、略有珍珠光澤的固體。因原料不同和制備方法不同,分子量有差異,不溶于水和堿溶液,可溶于稀的鹽酸、硝酸等無機酸和大多數(shù)有機酸。在稀酸中,殼聚糖的主鏈會緩慢水解,溶液的黏度也會逐漸降低。殼聚糖氨基的氮原子上具有一對未公用的電子,能從溶液中結合一個氫質子,從而使殼聚糖成為帶陽電荷的聚電解質,破壞殼聚糖分子內和分子間的氫鍵,使之溶于水中。殼聚糖的溶解度至少受3個因素的影響:①脫乙酰度。脫乙酰度越高,分子鏈上的游離氨基越多,離子化強度越高,也就越易溶于水;反之脫乙酰度越低,溶解度越小。②分子量。分子量越大,溶解度越小,因為殼聚糖分子內和分子間的氫鍵使得分子彼此纏繞在一起且比較僵硬。③酸的種類。稀硫酸,稀磷酸不能溶解殼聚糖。
殼聚糖溶液的穩(wěn)定性在使用過程中特別重要。殼聚糖的糖苷鍵是半縮醛結構,這種半縮醛結構對酸是不穩(wěn)定的。殼聚糖的酸性溶液在放置過程中會發(fā)生酸催化的水解反應,殼聚糖分子的主鏈不斷降解,黏度越來越低,分子量逐漸降低,最后被水解成寡糖和單糖。殼聚糖稀溶液的黏度不僅和溶液的PH有關系,也與殼聚糖的分子量有關系,殼聚糖分子量越高,其溶液的黏度就越大,分子量越低,黏度就越小。殼聚糖稀溶液的離子強度直接影響殼聚糖分子在溶液中的形態(tài)。殼聚糖能被人體吸收利用,與人體的組織器官及細胞有良好的組織相容性,無毒,具有生物降解性,幾乎無免疫原性,同時具有多種生物活性。經(jīng)過化學改性得到的殼聚糖衍生物,其物理化學性質得到改善,使其應用范圍大大拓展,因此殼聚糖及其衍生物的開發(fā)及應用研究已引起人們廣泛的興趣。